Rab5C kit-武漢紐斯特生物技術

檢測原理
武漢紐斯特生物技術有限公司的cd*2活性檢測*盒主要是利用識別蛋白特異形態(tài)的cd*2-gtp單克l隆*l體特異性的去檢測細胞提取物或者體外的（樣品需要進行gtpγs活化處理）活性cd*2-gtp的水平。簡言之，特異性識別cd*2活化構象的鼠單克l隆*l體可以特異性結合細胞裂解液中的cd*2-gtp活性蛋白，然后利用protein a/g將*原*l體的結合物吸附下來，再利用特異性識別cd*2活化構象的兔多克l隆*l體進行免l疫印跡分析進行檢測。
武漢紐斯特生物科技有限公司（wuhanneweastbiotechonologyco.ltd），系美國生命科學*供應商美國neweastbio在中國的子公司。美國neweastbio專注于生命科學和生物技術領域，主要產品有小分子、elisa*盒、蛋白等。
懸浮細胞
1.培養(yǎng)細胞并根據(jù)需要用活化劑或*l劑刺激。
2.進行細胞計數(shù)，rab5c kit，然后通過離心沉淀細胞。
3.吸出培養(yǎng)基，并用冰冷的pbs洗滌兩次。
4.完全除去pbs洗滌液，然后向細胞沉淀中加入冰冷的1x分析/裂解緩沖液
（每1 x 107池0.5 – 1 ml）。
5.通過重復移液裂解細胞。
6.將裂解物轉移至適當大小的試管中，并置于冰上。
7.如果發(fā)生核裂解，則細胞裂解液可能變得非常粘稠，難以移液。如果這
發(fā)生時，裂解液可通過27?號注射l器針頭3-4次以剪切
*組dna。
8.通過離心10分鐘（在4°c下為12，000 x g）清除裂解物。
9.收集上清液并將樣品保存在冰上以備立即使用，或速凍并保存在-
70°c以備將來使用。
陽性和陰性對照的體外gtpγs/ gdp蛋白質上樣量
注意：體內刺激細胞會激l活大約10％的可用rab35，而
體外gtpγs蛋白負載將激l活近90％的rab35。
1.將0.5 ml每種細胞提取物等分到兩個微量離心管中（或使用1 μg純化的rab35蛋白）。
2.向每個試管中加入20 μl 0.5 m edta（至20 mm終濃度）。
3.將5 μl 100 xgtpγs（至100 μm，終濃度）加到一個試管中（陽性對照）。
4.在第二個試管中加入5 μl 100 x gdp（至1 mm，終濃度）（陰性對照）。
5.在攪拌下將試管在30°c孵育30分鐘。
6.通過將試管放在冰上并添加32.5 μl 1 m mgcl2（至60 mm）。
當前沒有直接測定法來測量arl1 gtpases的激l活。
neweast biosciences arl1激l活檢測*盒基于特定于配置的單克l隆*l體，該*l體特異性識別arl1-gtp，但不能識別arl1-gdp。 鑒于單克l隆*l體對其*原的高度親和力，可以在短時間內進行激l活測定。 該測定法可提供可靠的結果，并具有一致的可重復性。
rab5c kit-武漢紐斯特生物技術由武漢紐斯特生物技術有限公司提供。武漢紐斯特生物技術有限公司為客戶提供“g蛋白活性,camp和cgmp elisa*盒,蛋白點突變”等業(yè)務，公司擁有“紐斯特”等品牌，專注于生*工等行業(yè)。，在湖北省武漢市東湖新技術開發(fā)區(qū)高新大道666號光谷生物城b3-3棟3樓的名聲不錯。歡迎來電垂詢，聯(lián)系人：樂經(jīng)理。